国产成人18黄网站免费-国产成人 免费观看-国产成品精品午夜视频-国产成年网站v片在线观看-天堂在线91-天堂伊人网

您好!歡迎訪問上海易匯生物科技有限公司網站!
全國服務咨詢熱線:

18501609238

當前位置:首頁 > 技術文章 > 微生物培養中蛋白胨的科學選擇策略與實踐指南

微生物培養中蛋白胨的科學選擇策略與實踐指南

更新時間:2025-09-22      點擊次數:184
微生物培養中蛋白胨的科學選擇策略與實踐指南
蛋白胨作為微生物培養基的核心氮源,其氨基酸組成、肽段分子量分布、雜質含量等特性,直接決定微生物的生長速率、代謝產物合成效率及實驗重復性。不同類型微生物(如細菌、真菌、厭氧菌)對氮源的需求差異顯著,例如乳酸菌偏好小分子肽與游離氨基酸,而產酶微生物則需充足的含硫氨基酸;不同應用場景(如科研實驗、工業發酵、環境監測)對蛋白胨的批次穩定性、安全性也有不同要求。本文從微生物特性分析、培養目標拆解、應用場景適配三個核心維度,系統梳理蛋白胨的選擇邏輯,結合典型案例提供可落地的選擇方案,同時關聯上海易匯生物的試劑供應服務,確保選擇過程高效且有保障。
一、核心依據:基于微生物特性的蛋白胨選擇
微生物的營養需求、代謝途徑及環境適應性,是選擇蛋白胨的首要依據,需重點關注微生物的 “氮源利用偏好" 與 “生長環境耐受性":
(一)微生物營養類型與氮源利用偏好
  1. 異養型細菌(如大腸桿菌、金黃色葡萄球菌)

  • 需求特點:偏好分子量 500-1000 Da 的多肽與游離氨基酸,需均衡的必需氨基酸(如賴氨酸、蛋氨酸)及 B 族維生素(如維生素 B1、B6)。

  • 蛋白胨選擇:優先選擇胰蛋白胨(動物源,經胰酶水解酪蛋白制成)或大豆蛋白胨(植物源,定向酶解工藝)。胰蛋白胨含豐富的小分子肽(占比 60% 以上),適合大腸桿菌等快速生長細菌,培養 12 小時 OD600 可達 1.5 以上;大豆蛋白胨經復合酶解后,含硫氨基酸含量提升至 2.5%,可滿足產酶細菌(如枯草芽孢桿菌)的代謝需求,酶活較普通蛋白胨提升 30%。

  • 注意事項:若培養耐藥菌(如耐甲氧西林金黃色葡萄球菌),需選擇無抗生素殘留的蛋白胨(如經 0.22μm 濾膜除菌的大豆蛋白胨),避免殘留抗生素抑制細菌生長。

  1. 乳酸菌(如雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌)

  • 需求特點:營養要求苛刻,需小分子肽(<500 Da)、游離氨基酸(如半胱氨酸)及生長因子(如葉酸、煙酸),且對滲透壓敏感。

  • 蛋白胨選擇:推薦選擇改性大豆蛋白胨(添加 0.1% 半胱氨酸鹽酸鹽)或乳清蛋白胨(牛奶源,經木瓜蛋白酶水解)。改性大豆蛋白胨中<500 Da 肽段占比達 90%,且含天然生長因子,培養雙歧桿菌活菌數可達 1.2×101? CFU/mL,較普通蛋白胨提升 50%;乳清蛋白胨乳糖含量低(<1%),可避免乳酸菌發酵乳糖導致的培養基 pH 驟降,適合嗜酸乳桿菌等耐酸菌株。

  1. 真菌(如酵母菌、黑曲霉)

  • 需求特點:可利用大分子肽(1000-3000 Da),需充足的碳氮比,且對氮源的耐受性較高(如高濃度肽段)。

  • 蛋白胨選擇:優先選擇麥芽蛋白胨(植物源,麥芽提取物水解制成)或酵母蛋白胨(微生物源,酵母菌自溶提取)。麥芽蛋白胨含豐富的多糖(如麥芽糊精),碳氮比達 3:1,適合酵母菌增殖,培養 24 小時菌落數可達 5×10? CFU/mL;酵母蛋白胨含酵母細胞壁成分(如 β- 葡聚糖),可誘導黑曲霉合成纖維素酶,酶活較大豆蛋白胨提升 40%。

  1. 厭氧菌(如梭狀芽孢桿菌、產甲烷菌)

  • 需求特點:需還原型氮源(如含巰基的氨基酸),且對氧敏感,蛋白胨需無氧化劑殘留。

  • 蛋白胨選擇:選擇厭氧專用改性蛋白胨,如添加 0.2% 硫代硫酸鈉的大豆蛋白胨或胰蛋白胨。此類蛋白胨可去除培養基中的溶解氧,同時提供還原型氨基酸,培養梭狀芽孢桿菌的產氣效率較普通蛋白胨提升 60%;需注意避免選擇含氧化劑(如亞硝酸鹽)的蛋白胨,防止厭氧菌氧化應激死亡。

(二)微生物生長環境耐受性
  1. 耐鹽微生物(如海洋弧菌、鹽單胞菌)

  • 需求特點:需低鹽蛋白胨,避免高鹽濃度加劇滲透壓脅迫。

  • 蛋白胨選擇:選擇經離子交換層析脫鹽的蛋白胨(如脫鹽大豆蛋白胨),電導率控制在 5 mS/cm 以下(普通蛋白胨電導率約 20 mS/cm)。脫鹽蛋白胨培養海洋弧菌的生長速率較普通蛋白胨提升 35%,且菌落形態更規整。

  1. pH 耐受微生物(如嗜酸乳桿菌、耐堿芽孢桿菌)

  • 需求特點:嗜酸微生物需 pH 穩定的蛋白胨(如低緩沖能力),耐堿微生物需含耐堿氨基酸(如精氨酸)的蛋白胨。

  • 蛋白胨選擇:嗜酸微生物選擇小麥蛋白胨(緩沖能力弱,pH 波動<0.2),耐堿微生物選擇添加 0.5% 精氨酸的大豆蛋白胨。小麥蛋白胨培養嗜酸乳桿菌時,培養基 pH 從 6.0 降至 4.0 的過程中,細菌存活率達 85%(普通蛋白胨存活率僅 60%);精氨酸改性大豆蛋白胨可提升耐堿芽孢桿菌的耐堿閾值(從 pH 10.0 升至 11.0)。

二、目標導向:基于培養目標的蛋白胨選擇
不同培養目標(如菌體增殖、代謝產物合成、微生物分離)對蛋白胨的功能需求差異顯著,需結合目標優先級選擇適配產品:
(一)菌體增殖目標(如益生菌生產、菌種保藏)
  1. 核心需求:高氮含量、豐富生長因子,促進菌體快速增殖,提高活菌數。

  1. 蛋白胨選擇

  • 優先選擇總氮含量 8%-10% 的蛋白胨(如胰蛋白胨、大豆蛋白胨),氮含量過低會導致菌體生長緩慢(如總氮含量 5% 的蛋白胨培養大腸桿菌,OD600 僅為 0.8)。

  • 含天然生長因子的蛋白胨(如酵母蛋白胨、乳清蛋白胨)更適合菌種保藏,可提升菌體存活率(如酵母蛋白胨保藏酵母菌,6 個月存活率達 90%,普通蛋白胨僅 70%)。

  1. 案例參考:某益生菌企業生產雙歧桿菌凍干制劑,選擇總氮含量 9% 的改性大豆蛋白胨(含 0.1% 半胱氨酸),發酵 12 小時活菌數達 1.5×101? CFU/mL,凍干后存活率 85%,符合國家標準(GB 4789.34-2012)。

(二)代謝產物合成目標(如抗生素、酶制劑生產)
  1. 核心需求:特定氨基酸(如含硫氨基酸、芳香族氨基酸)含量高,肽段分子量適配代謝途徑,且無抑制性雜質。

  1. 蛋白胨選擇

  • 抗生素生產(如青霉素):選擇含豐富脯氨酸、纈氨酸的小麥蛋白胨,此類氨基酸是青霉素合成的前體物質,可提升青霉素產量 15%(如小麥蛋白胨培養產黃青霉菌,青霉素濃度達 8000 U/mL)。

  • 酶制劑生產(如纖維素酶):選擇含誘導物的蛋白胨(如添加 0.2% 乳糖的大豆蛋白胨),乳糖可誘導微生物合成酶系,酶活較普通蛋白胨提升 40%。

  1. 注意事項:避免選擇含重金屬(如鉛、汞)的蛋白胨,重金屬會抑制酶活性(如鉛濃度>0.001 mg/kg 時,纖維素酶活下降 20%),需選擇重金屬含量<0.001 mg/kg 的高純度蛋白胨。

(三)微生物分離目標(如環境致病菌檢測、腸道菌群分析)
  1. 核心需求:選擇性強(如抑制雜菌生長)、低背景干擾,且能促進目標微生物生長。

  1. 蛋白胨選擇

  • 環境致病菌分離(如沙門氏菌):選擇含特定抑制劑的蛋白胨(如添加 0.01% 胰蛋白胨),可抑制大腸桿菌等雜菌,同時促進沙門氏菌生長,分離效率較普通蛋白胨提升 50%。

  • 腸道菌群分析(如雙歧桿菌):選擇厭氧專用蛋白胨(如添加 0.1% 半胱氨酸的大豆蛋白胨),可去除培養基中的氧,同時抑制需氧菌,目標菌檢出率達 95%(普通蛋白胨檢出率僅 75%)。

  1. 案例參考:某環境監測站分離土壤中的固氮菌,使用含 0.5% 甘露醇的大豆蛋白胨(無額外氮源),固氮菌可利用空氣中的氮氣生長,雜菌因缺氮受抑制,分離效率較胰蛋白胨培養基提升 40%。

三、場景適配:基于應用場景的蛋白胨選擇
科研實驗、工業生產、臨床檢測等場景對蛋白胨的批次穩定性、安全性、成本預算要求不同,需結合場景優先級綜合選擇:
(一)科研實驗場景(如微生物代謝機制研究、新藥篩選)
  1. 核心需求:批次一致性高(CV<5%)、純度高(無雜質干擾),且支持小批量采購(如 500 g / 瓶)。

  1. 蛋白胨選擇

  • 優先選擇品牌化、標準化蛋白胨(如 Thermo、Oxoid 的胰蛋白胨,上海易匯生物的植物源蛋白胨),此類產品每批次均進行肽段分子量分布、氨基酸組成檢測,批次間 CV<5%,確保實驗重復性。

  • 微量實驗(如單細胞培養)需選擇高純度蛋白胨(如 HPLC 純度>99%),避免雜質影響細胞生長(如雜質含量>1% 時,單細胞存活率下降 15%)。

  1. 試劑供應保障:科研實驗常需緊急補充試劑(如突發實驗需求),在科研單位領域,上海易匯生物提供試劑的現貨供應與定制化期貨服務,解決了科研單位 “緊急實驗缺耗材、長期需求難規劃" 的痛點。易匯生物的產品運營團隊表示,其現貨試劑可實現當日下單、次日送達,期貨定制服務則能根據科研周期提前 30-60 天鎖定產能,保障實驗進度穩定推進。例如某高校開展 “不同蛋白胨對乳酸菌代謝的影響" 研究,通過易匯生物現貨服務當日下單,次日收到大豆蛋白胨、小麥蛋白胨、胰蛋白胨各 500 g,避免實驗延誤。

(二)工業生產場景(如抗生素發酵、益生菌制劑生產)
  1. 核心需求:大規模供應(如 1 噸 / 批)、成本可控、符合 GMP 規范,且無生物安全風險。

  1. 蛋白胨選擇

  • 優先選擇植物源蛋白胨(如大豆蛋白胨、小麥蛋白胨),此類產品原料來源穩定(非轉基因大豆、有機小麥),成本較動物源蛋白胨低 20%,且無瘋牛病(BSE)、口蹄疫等動物源風險,符合 GMP 規范(內毒素<0.1 EU/mL)。

  • 連續發酵生產需選擇批次穩定性高的蛋白胨(如上海易匯生物的定制化大豆蛋白胨),可提前 30-60 天鎖定產能,確保每批次蛋白胨的肽段分子量分布、氨基酸組成一致(CV<3%),避免因批次差異導致發酵波動。

  1. 案例參考:某抗生素企業生產青霉素,選擇上海易匯生物的定制化小麥蛋白胨(總氮含量 8.5%,含硫氨基酸 2.2%),通過期貨服務提前 60 天鎖定半年產能,青霉素發酵濃度穩定在 8000 U/mL,批次間 CV=5.2%,較使用動物源蛋白胨的傳統工藝(CV=12.3%)穩定性顯著提升。

(三)臨床檢測場景(如病原菌診斷、腸道菌群檢測)
  1. 核心需求:無菌(無微生物污染)、無內毒素(<0.05 EU/mL)、且能快速促進目標菌生長(如 24 小時內形成可見菌落)。

  1. 蛋白胨選擇

  • 選擇無菌級蛋白胨(如經 121℃高壓蒸汽滅菌 30 分鐘的胰蛋白胨),且通過無菌檢驗(按照《中國藥典》2020 年版四部通則 1101),確保無雜菌污染,避免假陽性結果。

  • 內毒素含量需<0.05 EU/mL(臨床級標準),內毒素過高會導致檢測樣本中的細胞活化,影響病原菌分離(如內毒素>0.1 EU/mL 時,白細胞吞噬病原菌效率提升 30%,導致檢出率下降)。

  1. 注意事項:臨床檢測需選擇可溯源的蛋白胨(如每批次提供 COA 報告),確保符合臨床診斷標準,避免因試劑問題導致誤診。

四、選擇流程與質量驗證:確保蛋白胨適配性
(一)標準化選擇流程
  1. 明確核心需求:確定微生物類型(如細菌 / 真菌 / 厭氧菌)、培養目標(如菌體增殖 / 代謝產物合成)、應用場景(如科研 / 工業 / 臨床),列出關鍵指標(如氮含量、肽段分子量、內毒素)。

  1. 初選蛋白胨類型:根據微生物特性與目標,初步篩選蛋白胨來源(植物源 / 動物源 / 微生物源)與規格(如無菌級、脫鹽級)。

  1. 小批量預實驗:采購小批量(如 100 g)候選蛋白胨,進行預實驗(如測定菌體生長曲線、代謝產物產量),對比不同蛋白胨的性能(如生長速率、產物濃度、重復性)。

  1. 質量驗證:對優選蛋白胨進行關鍵指標檢測(如凱氏定氮法測總氮、HPGFC 測肽段分子量、HPLC 測氨基酸組成),確保符合需求。

  1. 確定供應方案:根據實驗周期與用量,選擇現貨或期貨供應(如科研短期實驗選現貨,工業長期生產選期貨),確保試劑穩定供應。

(二)關鍵質量指標驗證
  1. 總氮含量:通過凱氏定氮法檢測,微生物培養常用蛋白胨總氮含量為 7%-10%,過低會導致生長緩慢,過高會導致滲透壓脅迫(如總氮含量>12% 時,大腸桿菌 OD600 下降 20%)。

  1. 肽段分子量分布:通過高效凝膠過濾色譜法(HPGFC)檢測,快速生長菌(如大腸桿菌)適合 500-1000 Da 肽段占比>60% 的蛋白胨,慢生長菌(如乳酸菌)適合<500 Da 肽段占比>80% 的蛋白胨。

  1. 氨基酸組成:通過高效液相色譜法(HPLC)檢測,確保必需氨基酸占比≥40%,含硫氨基酸(蛋氨酸、半胱氨酸)含量≥1.5%(產酶微生物需求)。

  1. 無菌與內毒素:無菌檢驗通過涂布平板法(37℃培養 48 小時無菌落),內毒素檢測通過鱟試劑法(臨床級<0.05 EU/mL,工業級<0.1 EU/mL)。

五、結論
微生物培養中蛋白胨的選擇需以 “微生物特性為基礎、培養目標為導向、應用場景為約束",通過明確微生物營養偏好、拆解培養核心需求、適配場景優先級,結合小批量預實驗與質量驗證,才能選出蛋白胨。植物源蛋白胨憑借無動物源風險、成分可控、成本優勢,在工業生產與綠色科研中應用前景廣闊;動物源蛋白胨(如胰蛋白胨)因小分子肽含量高,適合快速生長菌培養;微生物源蛋白胨(如酵母蛋白胨)則在真菌培養與酶制劑生產中表現突出。
上海易匯生物的現貨與期貨供應服務,為不同場景提供試劑保障 —— 科研實驗可通過現貨快速獲取小批量多類型蛋白胨,工業生產可通過期貨鎖定大規模定制化產品,確保實驗與生產穩定推進。未來,隨著蛋白胨制備技術的革新(如功能強化型、廢棄物資源化蛋白胨),選擇范圍將進一步拓寬,為微生物學研究與生物產業發展提供更精準的氮源支撐。



上海易匯生物科技有限公司
地址:上海市奉賢區金大公路8218號1幢
郵箱:1006909781@qq.com
傳真:QQ1006909781
關注我們
歡迎您關注我們的微信公眾號了解更多信息:
歡迎您關注我們的微信公眾號
了解更多信息
把腿张开老子臊烂你在线观看| 波多野结衣无码中文字幕18禁 | 91夜色精品偷窥熟女精品网站| 少妇高潮惨叫久久久久久| 精品人伦一区二区三区潘金莲| JAPAN丰满人妻VIDEOS| 亚欧免费无码AⅤ在线观看蜜桃| 免费无码又爽又刺激动态图| 国产精品久久久久久免费软件| 又湿又紧又大又爽又A视频| 少妇婬荡久久久久AV无码| 久久久久国产精品| 高潮毛片无遮挡高清免费| 艳妇乳肉豪妇荡乳AV| 少妇泬出白浆18P| 老阿姨哔哩哔哩B站肉片入口6| 丰满圆润大胸在线| 影音先锋最新AV资源网站| 天天爽天天爽夜夜爽毛片| 麻豆文化传媒精品一区观看| 国产精品多人P群无码| 中中文日产幕无线码一区| 小SB是不是想被C了| 欧美人与性口牲恔配视频| 极品婬荡少妇XXXX欧美图片| 草莓视频免费观看| 亚洲最大的AV无码网站| 婷婷综合久久中文字幕蜜桃三电影| 乱中年女人伦AV一区二区| 国产剧情AV在线| MD豆传媒一二三区| 亚洲欧美成人综合久久久| 色综合AV男人的天堂伊人| 美女裸体无遮挡永久免费视频AP | 亚洲成AV人片在线观看无线| 日韩AV一区二区三区| 久久婷婷国产综合精品| 国产精品欧美一区二区三区| FREE俄罗斯免费视频| 亚洲人成未满十八禁网站| 丝瓜秋葵草莓香蕉榴莲绿| 男人J放进女人P全黄动态图| 黑人上司粗大拔不出来| 懂色av 春色 色欲| 中文无码VR最新无码AV专区| 亚洲AV成人一区国产精品小说| 日本国产一区二区三区在线观看| 久久久久人妻精品一区三寸| 国产精品久免费的黄网站| AV人摸人人人澡人人超碰小说| 亚洲乱码精品久久久久| 特级毛片A级毛片在线播放WWW| 男男射精控制PLAY小说| 精品国产AⅤ一区二区三区在线看 精品国产AⅤ一区二区三区V视界 精品国产AⅤ一区二区三区V免费 精品国产AⅤ一区二区三区4区 | 7777久久亚洲中文字幕| 亚洲国产成人久久综合碰碰| 三上悠亚SSNI-542在线| 免费中国帅气体育生GARY| 和朋友换娶妻野外夫妇3| 儿子耕了母亲荒废的田清朝| 97久久天天综合色天天综合色H| 亚洲精品乱码久久久久66| 同桌上课脱裙子让我帮他自慰| 欧美又粗又大XXXXBBBB疯狂| 久久久久人妻精品一区蜜桃 | 黑人巨大跨种族VIDEO| 国产成人精品午夜福利| YY6080久久亚洲精品| 在线观看无码AV网站永久| 亚洲变态另类调教久久久| 色欲色香天天天综合无码| 欧美男女一进一出| 久久天天躁夜夜躁狠狠躁2022| 国产真实自在自偷| 国产成人高清精品免费软件 | 亚洲AV乱码一区二区三区在线观看| 日日澡夜夜澡人人高潮| 欧美大波少妇在厨房被| 久久人搡人人玩人妻精品首页| 国语对白做受XXXXX在线| 国产超碰人人爽人人做人人添| YYYY11111少妇影院| 中文字幕无码精品亚洲资源网| 亚洲熟妇无码A∨| 亚洲AV无码国产在丝袜APP| 玩弄丰满少妇XXXXX性多毛| 日韩一线无码AV毛片免费| 欧美性猛交一区二区三区精品| 伦人伦XXXX国语对白| 久久国产精品成人免费| 黑人xxx欧美性爱| 国产乱子伦高清露脸对白| 高潮又爽又黄又无遮挡动态图 | 99久久久国产精品免费| 在教室伦流澡到高潮H强圩| 亚洲日韩片无码中文字幕| 亚洲成人Av在线| 亚洲AV成人无码精品| 无码口爆内射颜射后入| 私密按摩高潮熟女啪啪 | 亚洲AV永久精品无码桃色| 无码人妻AV一区二区三区蜜臀 | 夫妇当面交换作爱2| 成人年无码AV片在线观看| CAOPORM超免费公开视频| 中文字幕无线码免费人妻| 一区二区在线视频| 亚洲综合欧美在线一区在线播放| 亚洲国产婷婷香蕉久久久久久| 亚洲AV成人一区国产精品| 香港三级日本三级A视频| 无码精品人妻一区二区三区人妻斩| 少妇被躁爽到高潮无码| 色婷婷综合久久久中文字幕| 日本少妇自慰高清喷浆| 日本动漫爆乳H动漫无遮挡| 欧洲无码一区二区三区在线观看| 欧美黑大粗无码免费视频| 男人边吃奶边揉好爽免费视频 | 2021国产麻豆剧传媒网站| 中文字幕人妻无码专区APP| 制服丝袜长腿无码专区第一页| 影音先锋女人AV鲁色资源网久久| 一本到无码AV专区无码| 一本一道久久综合狠狠老| 一本大道香蕉久中文在线播放| 亚洲最大天堂无码精品区| 亚洲中文字幕无码中文字在线| 亚洲中文无码人A∨在线导航 | 奶头又大又白喷奶水AV| 内射极品少妇一区二区av| 女技师强制高潮18XXXX按摩| 牛和人交VIDEOS欧美3D| 欧美成人精品高清视频| 欧美巨大XXXX做受| 人妻丰满熟妇av无码区HD| 人妻少妇一区二区| 日本一本2017国产| 色偷偷久久一区二区三区| 四虎永久在线精品免费无码 | 性色AV免费网站| 亚洲AV无码专区在线| 亚洲大尺度无码无码专区| 亚洲乱亚洲乱少妇无码| 亚洲制服丝袜中文字幕在线| 与子敌伦刺激对白播放| 18禁美女裸体爆乳无遮挡动图| 88国产精品欧美一区二区三区| 99久久精品免费看国产| 白嫩无码人妻丰满熟妇啪啪区百度| 成人毛片18女人毛片免费| 丰满熟妇人妻中文字幕| 国产精品久久久久9999无码| 国产亚洲成AⅤ人片在线观看| 黑人上司与人妻激烈中文字幕 | 两毫米的小洞你却稳稳命中| 妺妺窝人体色WWW人体色| 欧美性白人极品HD| 肉欲扒灰合集100篇| 无码VR最新无码AV专区| 亚洲AV日韩AV高潮潮喷无码| 亚洲乱亚洲乱妇无码麻豆| 一面亲上边一面膜下边56| 337P日本欧洲亚洲大胆69影| ZOMBIE老头SUPREME| 丰满妇女强高潮18ⅩXXX| 国产精品无码素人福利| 狠狠躁夜夜躁人人爽天天天天| 久久精品九九亚洲精品| 免费一区二区三区成人免费视频| 清一区二区国产好的精华液| 丧尸 湿润 粗大 快感 变异| 无码人妻精品一区二区三18禁| 亚洲AV无码专区亚洲AV紧身裤| 野花社区WWW在线视频官网| 2021无码专区人妻系列日韩| 草莓视频APP下载| 国产精品久久国产三级国| 激情内射日本一区二区三区| 久久人妻无码一区二区三区av| 欧美成人少妇人妻精品视频| 色偷偷亚洲第一成人综合网址| 午夜三级A三级三点窝| 亚洲色大成网站WWW永久网站| 18款禁用免费安装的软件APP | 国产95在线 | 免费| 好紧好骚好诱人好软| 老师掀起裙子让我挺进| 人妻少妇乱子伦无码视频专区 | 少妇风流AAAAA毛片| 亚洲AV无码专区国产乱码不卡| 伊人精品无码一区二区三区电影| BBOX撕裂BASS后门在线| 国产AV大学生第一次破| 黑人巨大精品欧美黑寡妇| 没带罩子被校霸C了一节课怎么办 么公的好大好硬好深好爽视频 | 51精产国品一二三产区区| 第一次处破女01免费观看| 国产综合久久久久久鬼色| 老赵抱着月月在厨房做视频|