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GE Life FICOLL PAQUE PLUS高效淋巴細(xì)胞分離

更新時(shí)間:2025-05-29      點(diǎn)擊次數(shù):480

GE Life FICOLL PAQUE PLUS高效淋巴細(xì)胞分離

在生命科學(xué)研究領(lǐng)域,對(duì)細(xì)胞進(jìn)行高效、高純度的分離是眾多實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵起始步驟。GE Life 的 FICOLL PAQUE PLUS(貨號(hào) 17144002)作為一款備受認(rèn)可的細(xì)胞分離介質(zhì),在淋巴細(xì)胞分離等實(shí)驗(yàn)中發(fā)揮著重要作用,為科研人員提供了可靠的技術(shù)支持。

產(chǎn)品概述

FICOLL PAQUE PLUS 是一種無(wú)菌的即用型密度梯度介質(zhì) ,專(zhuān)為從人外周血中分離淋巴細(xì)胞而精心設(shè)計(jì),在全球?qū)嶒?yàn)室中已成為體外研究的標(biāo)準(zhǔn)選擇。它能助力科研人員獲取高產(chǎn)率、高純度的淋巴細(xì)胞,滿(mǎn)足多種科研實(shí)驗(yàn)對(duì)細(xì)胞樣本的嚴(yán)格要求。該產(chǎn)品的包裝規(guī)格有多種,如常見(jiàn)的 6×100 mL 裝,方便不同規(guī)模實(shí)驗(yàn)的需求。

核心技術(shù)原理

  1. 密度梯度離心原理:血液中各類(lèi)細(xì)胞的密度存在差異 ,紅細(xì)胞和多核白細(xì)胞比重較大,約為 1.092,而淋巴細(xì)胞和單個(gè)核細(xì)胞比重相對(duì)較小,在 1.075 左右。FICOLL PAQUE PLUS 的密度精準(zhǔn)控制在 1.077±0.001 g/mL,這一密度恰好介于紅細(xì)胞和淋巴細(xì)胞之間。當(dāng)含有多種細(xì)胞的血液樣本與 FICOLL PAQUE PLUS 混合后進(jìn)行離心時(shí),不同細(xì)胞會(huì)依據(jù)自身密度在離心力的作用下,在分離液中形成不同的層次,從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分離。

  1. 成分協(xié)同作用:其主要成分包括 9.0% (w/v) 的泛影葡胺鈉、5.7% (w/v) 的 Ficoll PM400 以及 0.0231%(w/v) 的依地酸鈣鈉 。泛影葡胺鈉可增加溶液的密度,有助于形成穩(wěn)定的密度梯度;Ficoll PM400 作為一種高分子量蔗糖聚合物,能促進(jìn)紅細(xì)胞的凝集,使得紅細(xì)胞在離心過(guò)程中更容易沉淀,從而與淋巴細(xì)胞更好地分離;依地酸鈣鈉則起到抗凝作用,防止血液樣本在分離過(guò)程中發(fā)生凝固,保證細(xì)胞的完整性和活性。

產(chǎn)品性能優(yōu)勢(shì)

  1. 高純度與高回收率:使用 FICOLL PAQUE PLUS 分離淋巴細(xì)胞,所得單核細(xì)胞含量可達(dá) 95 ±5% ,淋巴細(xì)胞得率為 60 ± 20%。這意味著科研人員能夠從外周血樣本中獲取到高純度的淋巴細(xì)胞,且細(xì)胞的回收率較高,為后續(xù)實(shí)驗(yàn)提供了充足且優(yōu)質(zhì)的細(xì)胞材料。無(wú)論是進(jìn)行淋巴細(xì)胞功能研究,還是基于淋巴細(xì)胞的細(xì)胞治療探索等,高純度和高回收率的淋巴細(xì)胞樣本都至關(guān)重要,能有效減少雜質(zhì)細(xì)胞對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾,提高實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。

  1. 良好的細(xì)胞活力維持:該產(chǎn)品在分離過(guò)程中能很好地維持淋巴細(xì)胞的活力 ,細(xì)胞存活率可達(dá) 95 ±5%。這得益于其溫和的分離條件以及對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性的成分。高活力的淋巴細(xì)胞對(duì)于需要細(xì)胞繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)、增殖或功能檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)尤為關(guān)鍵,如淋巴細(xì)胞的體外刺激實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞因子分泌檢測(cè)等,只有保持細(xì)胞的高活力,才能真實(shí)反映淋巴細(xì)胞在生理狀態(tài)下的功能和特性。

  1. 低內(nèi)毒素水平:FICOLL PAQUE PLUS 的內(nèi)毒素水平極低,小于 0.12 EU/mL 。內(nèi)毒素的存在可能會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用,影響細(xì)胞的正常生理功能,進(jìn)而干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。低內(nèi)毒素水平保證了分離得到的淋巴細(xì)胞不受內(nèi)毒素的污染和干擾,對(duì)于一些對(duì)內(nèi)毒素敏感的實(shí)驗(yàn),如細(xì)胞培養(yǎng)、免疫細(xì)胞功能研究等,能夠提供更純凈、可靠的細(xì)胞樣本,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。

  1. 操作簡(jiǎn)便快速:基于 Boyum 發(fā)展的方法,使用 FICOLL PAQUE PLUS 進(jìn)行淋巴細(xì)胞分離僅需簡(jiǎn)單快速的離心操作 。科研人員只需將適量的血液樣本小心鋪加在 FICOLL PAQUE PLUS 分離液上方,然后放入離心機(jī)中,按照推薦的離心條件進(jìn)行離心,即可實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分層分離。整個(gè)操作過(guò)程無(wú)需復(fù)雜的設(shè)備和繁瑣的步驟,即使是實(shí)驗(yàn)新手也能快速上手,大大提高了實(shí)驗(yàn)效率,節(jié)省了科研時(shí)間。

與其他淋巴細(xì)胞分離方法的對(duì)比

對(duì)比維度
FICOLL PAQUE PLUS
紅細(xì)胞裂解液法
流式細(xì)胞分選法
磁珠分選法
分離純度
單核細(xì)胞含量 95 ±5%
純度較低,易殘留雜質(zhì)
純度高,但可能存在損失
純度較高,特異性強(qiáng)
細(xì)胞活力
存活率 95 ±5%
對(duì)細(xì)胞有一定損傷
操作復(fù)雜,影響活力
可能影響細(xì)胞功能
操作難度
簡(jiǎn)單,僅需離心
步驟相對(duì)復(fù)雜
需專(zhuān)業(yè)設(shè)備與技術(shù)
需特定設(shè)備與操作
分離時(shí)間
較短
中等
較長(zhǎng)
中等
成本
適中
較低
設(shè)備昂貴,成本高
磁珠成本較高
適用場(chǎng)景
常規(guī)實(shí)驗(yàn)
對(duì)純度要求不高的實(shí)驗(yàn)
高純度特殊需求實(shí)驗(yàn)
特定細(xì)胞亞群分離

1. 與紅細(xì)胞裂解液法對(duì)比

紅細(xì)胞裂解液法通過(guò)化學(xué)試劑裂解紅細(xì)胞,從而實(shí)現(xiàn)淋巴細(xì)胞的分離 。然而,這種方法容易導(dǎo)致細(xì)胞碎片殘留,分離得到的淋巴細(xì)胞純度較低,難以滿(mǎn)足對(duì)細(xì)胞純度要求較高的實(shí)驗(yàn)。同時(shí),裂解液對(duì)淋巴細(xì)胞也可能產(chǎn)生一定的損傷,影響細(xì)胞活力。相比之下,F(xiàn)ICOLL PAQUE PLUS 利用密度梯度離心原理,能有效避免細(xì)胞碎片殘留問(wèn)題,且對(duì)細(xì)胞的損傷極小,在分離純度和細(xì)胞活力方面具有明顯優(yōu)勢(shì)。

2. 與流式細(xì)胞分選法對(duì)比

流式細(xì)胞分選法可根據(jù)細(xì)胞的物理和化學(xué)特性對(duì)淋巴細(xì)胞進(jìn)行精準(zhǔn)分選,純度 。但該方法需要專(zhuān)業(yè)的流式細(xì)胞儀設(shè)備,操作過(guò)程復(fù)雜,對(duì)操作人員的技術(shù)要求較高,且分選過(guò)程可能會(huì)對(duì)細(xì)胞造成一定的機(jī)械損傷,影響細(xì)胞活力。此外,設(shè)備和試劑成本高昂,限制了其在常規(guī)實(shí)驗(yàn)室中的廣泛應(yīng)用。FICOLL PAQUE PLUS 操作簡(jiǎn)便,無(wú)需復(fù)雜設(shè)備,且能較好地維持細(xì)胞活力,對(duì)于大多數(shù)常規(guī)科研實(shí)驗(yàn)而言,是更經(jīng)濟(jì)、高效的選擇。

3. 與磁珠分選法對(duì)比

磁珠分選法利用磁珠與特定細(xì)胞表面標(biāo)志物的特異性結(jié)合,通過(guò)磁場(chǎng)作用分離淋巴細(xì)胞,可實(shí)現(xiàn)對(duì)特定細(xì)胞亞群的高效分離 。不過(guò),磁珠與細(xì)胞的結(jié)合可能會(huì)影響細(xì)胞的功能,且磁珠成本較高。而 FICOLL PAQUE PLUS 無(wú)需依賴(lài)細(xì)胞表面標(biāo)志物,能分離獲得多種淋巴細(xì)胞亞群的混合樣本,適用于對(duì)淋巴細(xì)胞整體研究的實(shí)驗(yàn),且成本相對(duì)較低,操作更簡(jiǎn)便。

應(yīng)用領(lǐng)域

  1. 免疫學(xué)研究:在免疫學(xué)研究中,淋巴細(xì)胞是核心研究對(duì)象 。FICOLL PAQUE PLUS 分離得到的高純度、高活力淋巴細(xì)胞,可用于研究淋巴細(xì)胞的免疫應(yīng)答機(jī)制,如 T 細(xì)胞和 B 細(xì)胞的活化、增殖、分化過(guò)程,以及它們?cè)诿庖叻烙⒚庖哒{(diào)節(jié)中的作用。通過(guò)對(duì)淋巴細(xì)胞的深入研究,有助于揭示免疫系統(tǒng)的工作原理,為開(kāi)發(fā)新型免疫治療方法、疫苗等提供理論基礎(chǔ)。例如,在腫瘤免疫治療研究中,分離出的淋巴細(xì)胞可用于體外擴(kuò)增和修飾,使其具備更強(qiáng)的抗腫瘤活性,再回輸?shù)交颊唧w內(nèi),以達(dá)到治療腫瘤的目的。

  1. 傳染病研究:在傳染病研究領(lǐng)域,淋巴細(xì)胞在機(jī)體對(duì)抗病原體感染的過(guò)程中發(fā)揮著重要作用 。利用 FICOLL PAQUE PLUS 分離患者外周血中的淋巴細(xì)胞,可用于研究淋巴細(xì)胞對(duì)病原體的免疫反應(yīng),包括淋巴細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的類(lèi)型和水平、淋巴細(xì)胞對(duì)病原體的殺傷能力等。這有助于深入了解傳染病的發(fā)病機(jī)制,為開(kāi)發(fā)針對(duì)性的治療藥物和疫苗提供關(guān)鍵線索。例如,在艾滋病研究中,通過(guò)對(duì) HIV 感染者淋巴細(xì)胞的研究,可探索 HIV 病毒如何感染淋巴細(xì)胞以及淋巴細(xì)胞如何抵抗病毒感染,為尋找有效的艾滋病治療方法提供方向。

  1. 血液學(xué)研究:在血液學(xué)研究中,淋巴細(xì)胞的數(shù)量和功能變化與多種血液疾病密切相關(guān) 。FICOLL PAQUE PLUS 可用于從患者血液樣本中分離淋巴細(xì)胞,用于分析淋巴細(xì)胞在白血病、淋巴瘤等血液腫瘤中的異常表現(xiàn),如細(xì)胞形態(tài)、免疫表型、基因表達(dá)等方面的變化。通過(guò)對(duì)這些異常的研究,有助于血液疾病的診斷、分型和預(yù)后評(píng)估,同時(shí)也為開(kāi)發(fā)新的治療策略提供依據(jù)。例如,在白血病的診斷和治療監(jiān)測(cè)中,準(zhǔn)確分離和分析淋巴細(xì)胞的變化,對(duì)于判斷病情進(jìn)展和治療效果具有重要意義。

產(chǎn)品使用說(shuō)明

  1. 樣本準(zhǔn)備:使用 FICOLL PAQUE PLUS 時(shí),建議使用新鮮采集的人外周血樣本 。采血過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作原則,使用無(wú)熱原、無(wú)內(nèi)毒素的采血器材。采集后的血液樣本若不能立即進(jìn)行分離,可在室溫下短暫保存,但不宜超過(guò)數(shù)小時(shí),以免影響細(xì)胞活性和分離效果。若需長(zhǎng)時(shí)間保存,可采用適當(dāng)?shù)目鼓齽┨幚砗螅诘蜏叵卤4妫珣?yīng)注意保存條件對(duì)細(xì)胞的影響。

  1. 實(shí)驗(yàn)操作流程:操作時(shí),先將 FICOLL PAQUE PLUS 分離液小心轉(zhuǎn)移至離心管中,注意不要產(chǎn)生氣泡 。然后用移液器將稀釋后的血液樣本緩慢鋪加在分離液上方,形成清晰的界面。血液與分離液的體積比推薦為 2:3 。將離心管放入離心機(jī)中,按照推薦的離心條件(如室溫下,以特定轉(zhuǎn)速離心一定時(shí)間,具體參數(shù)可參考產(chǎn)品說(shuō)明書(shū))進(jìn)行離心。離心結(jié)束后,可觀察到明顯的細(xì)胞分層,位于分離液界面上的白膜層即為富含淋巴細(xì)胞的單個(gè)核細(xì)胞層。使用移液器小心吸取該層細(xì)胞,轉(zhuǎn)移至新的離心管中,再通過(guò)適當(dāng)?shù)南礈觳襟E去除殘留的分離液和雜質(zhì),即可獲得相對(duì)純凈的淋巴細(xì)胞。

  1. 存儲(chǔ)條件:為保證 FICOLL PAQUE PLUS 的性能,應(yīng)將其存儲(chǔ)于 4 - 30℃的環(huán)境中 。避免陽(yáng)光直射和高溫環(huán)境,防止產(chǎn)品變質(zhì)。在使用過(guò)程中,要注意產(chǎn)品的有效期,盡量在有效期內(nèi)使用,以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。開(kāi)封后的產(chǎn)品應(yīng)盡快使用,并妥善保存剩余部分,防止微生物污染。若發(fā)現(xiàn)產(chǎn)品出現(xiàn)渾濁、沉淀或顏色異常等情況,請(qǐng)勿使用。

GE Life 的 FICOLL PAQUE PLUS 憑借其先進(jìn)的技術(shù)原理、性能表現(xiàn)、廣泛的應(yīng)用范圍以及相較于其他方法的顯著優(yōu)勢(shì),成為科研人員在淋巴細(xì)胞分離領(lǐng)域的得力工具 。無(wú)論是基礎(chǔ)科研探索,還是臨床應(yīng)用研究,它都能為科研工作提供高質(zhì)量的淋巴細(xì)胞樣本,助力科研人員在生命科學(xué)領(lǐng)域不斷取得新的突破。但需注意,本產(chǎn)品僅用于科研用途,不可用于臨床診斷或治療。在使用過(guò)程中,若遇到任何問(wèn)題,可隨時(shí)聯(lián)系 GE Life 專(zhuān)業(yè)的技術(shù)支持團(tuán)隊(duì)獲取幫助。


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